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    1. 上海遠慕生物科技有限公司

      淺談磷酸化和非磷酸化的抗體區別
      點擊次數:40 發布時間:2022-07-19
       

        1.磷酸化抗體的檢測的是出于活性狀態(磷酸化)的蛋白。

        2.磷酸化抗體只針對磷酸化位點設計,是一種位點特異性的多抗,這到有些單抗的特性。

        3.普通抗體的合成(多抗):原核表達蛋白->純化->免疫動物->收獲抗體。

        4.磷酸化抗體合成:人工合成含磷酸化位點的多肽->人工體外磷酸化->鏈接半抗原->免疫動物->收獲抗體。

        5.磷酸化的蛋白很大部分是轉錄相關因子。因此使用磷酸化抗體和普通抗體。檢測同一個蛋白,原位檢測可能具有不同的細胞定位。轉錄因子磷酸化后由細胞質進入細胞核。

        6.一般而言,磷酸化蛋白的實驗結果與分子功能更直接相關。

        非磷酸化抗體是測該蛋白的含量,不能知道其活性狀態,磷酸化抗體是測該蛋白的磷酸化水平如何,側重于了解該蛋白的一種活性狀態。

        磷酸化抗體主要是針對磷酸化位點制備的,檢測該蛋白在細胞受到刺激時該蛋白的變化情況(磷酸化水平增強還是減弱)。

        非磷酸化抗體(主要針對非磷酸化位點的肽段制備的)主要檢測組織或細胞中該蛋白的表達情況,組織分布或細胞中定位,同時可以作為磷酸化水平變化的內參等。

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