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    1. 上海遠慕生物科技有限公司

      淺談血清污染和過濾的問題
      點擊次數:47 發布時間:2022-07-21

       1、問:懷疑購買的Gibco胚胎干細胞專用胎牛血清(Gibco ES專用胎牛血清)染菌,想用濾膜過濾一下,可否自己用0.22μm濾膜過濾?對血清性質有多大影響?有做過的么?

      答:可以過濾的,血清當出廠時都是0.22μm或0.1μm過濾除菌。想證明有沒有染菌不用過濾這么麻煩,只要放置于37℃過夜就可以了,如果有微生物污染會變渾濁的,如果還是澄清的就說明沒有問題的。實驗室中血清很難直接過濾,一般要加到培養基中再過濾。我們實驗室制備培養基時,都使用濾膜過濾,一般而言如果制備1-2瓶培養基,一個濾膜及一支30ml注射器可以過濾50ml小牛血清。如果大量制備培養基也可以將血清加到培養基中,使用0.22微米的大濾膜一起過濾。

      2、問:我懷疑我用的完全1640培養液被污染了,準備重新過濾消毒,過濾后是否需要補充胎牛血清?如需又如何補充?

      答:完全1640培養液被污染了,如果是支原體的話,過濾沒有作用,支原體可以通過濾膜。我們用1640液,都是配液后保留500ml,然后其他的分裝100-200ml,現用現配因為血清比1640要貴,如果你想過濾的話,建議你加原比例血清,因為Gibco牛血清不會很容易通過濾膜。最主要的還是找到可能污染的原因。

      3、問:加好了Gibco牛血清雙抗的培養基由于污染了再過濾后還能用嗎?

      答:建議不要用了。在加了雙抗的情況下已經污染,那么細菌污染的可能性會較小了。一般的過濾除不能去除病毒或者部分真菌的污染的。

      4、問:我準備把使用的完全1640培養液重新過濾一遍,不知道培養液中的血清成分是否能通過濾膜,過濾后是否還需要補充胎牛血清?如需又如何補充?

      答:可以透過,但是隨著液體量的增多會很慢,如果不加壓會比較麻煩,還有最好用低蛋白吸附的,不然損失是比較大的。淺談血清污染和過濾的問題

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